Säle und Privaträume, von einigen der berühmtesten Künstler der Florentiner Renaissance prunkvoll gestaltet mit historischen Möbeln und außerordentlichen Meisterwerken wie der Judith von Donatello, dem Genius des Sieges von Michelangelo und dem Putto von Verrocchio. Seit mehr als sieben Jahrhunderten ist der Palazzo Vecchio Mittelpunkt der florentinischen Regierung und Wahrzeichen der Stadt. Er wurde 1299 als Sitz des obersten Regierungsorgans erbaut und Mitte des 16. Jahrhunderts zum herzoglichen Palast umgestaltet; heute befindet sich hier die Stadtverwaltung von Florenz.
Der Besuch beginnt im Innenhof, dem Cortile di Michelozzo mit seinen Stuckornamenten und Fresken und setzt sich im Obergeschoss mit dem Salone dei Cinquecento, dem Saal der Fünfhundert, fort, wo ein überwältigender Gemäldezyklus die Apotheose (Verherrlichung) von Cosimo de’ Medici und der Stadt Florenz zelebriert und neben dem berühmten Genius des Sieges von Michelangelo eine reiche Auswahl an Statuen zu bewundern ist. Im zweiten Stock des Museums befinden sich die prächtig dekorierten und eingerichteten Privaträume, darunter die besonders schöne Kapelle der Eleonora mit Malereien von Agnolo Bronzino. Im Landkartensaal, der Sala delle Carte Geografiche, bieten ein überdimensionaler Globus sowie mehr als fünfzig bemalte Tafeln eine einzigartige Ansicht aller im 16. Jahrhundert bekannten Erdteile. Im Quartiere del Mezzanino befindet sich eine wertvolle Sammlung an Gemälden und Skulpturen aus dem Mittelalter und der Renaissance, bei denen es sich um eine Stiftung von Charles Loeser an die Stadt Florenz handelt.