La Galleria degli Uffizi è il museo più visitato in Italia per un motivo molto semplice: offre al visitatore un'enorme concentrazione di capolavori assoluti, in particolare dipinti rinascimentali per i quali Firenze è divenuta famosa in tutto il mondo. La Galleria si trova al primo e secondo piano di un ampio edificio eretto tra il 1560 e il 1580, progettato da Giorgio Vasari per essere il quartier generale degli uffici amministrativi del Granducato di Toscana. In origine ospitava dipinti e sculture della collezione Medici, ed era aperto a una cerchia ristretta di pubblico già nel XVI secolo.
I visitatori degli Uffizi possono ammirare i capolavori in ordine cronologico, a partire dai dipinti medievali per arrivare alla stanza dedicata alle grandi pale d’altare di Giotto e Cimabue. La visita prosegue con i pittori rinascimentali toscani Piero della Francesca, Paolo Uccello e Filippo Lippi. Un’intera sala è dedicata ai celebri dipinti di Botticelli, Nascita di Venere e La Primavera. Il percorso museale continua con le opere del XV secolo da Siena, Veneto (Mantegna, Tiziano, Bellini, Correggio e Canaletto), Emilia Romagna e Lombardia. Spostandosi verso il tardo Rinascimento, troviamo i capolavori di Leonardo da Vinci, Raffaello e il Tondo Doni di Michelangelo.

Importante anche la collezione di dipinti tedeschi, olandesi e fiamminghi che include Dürer, Rembrandt, Rubens e Goya, situati in nuove stanze appositamente adibite. Altre collezioni includono la collezione medicea di statue e busti antichi e il Gabinetto dei Disegni e delle Stampe, che, occasionalmente, ospita mostre speciali di opere selezionate. La collezione di autoritratti è stata aperta nel 2023 con 12 sale che espongono in maniera permanente oltre 200 opere di artisti, coprendo un periodo di 600 anni.